1、RT-PCR： RT-PCR 原理：首先提起RNA，然后用逆转录酶与MRNA为模板进行CDNA第一链的合成，然后的原理和PCR就一样了！ RT-PCR意义：RT-PCR是个半定量的试验，可以确定在MRNA水平的表达差异，即在转录水平 ! 2、免疫PCR(immuno polymerase chain reaction , IPCR IPCR原理：是用一段已知DNA 分子标记抗体作为探针,用此探针与待测抗原反应,PCR 扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA 分子,电泳定性,根据特异性PCR 产物的有无,来判断待测抗原是否存在。 IPCR意义：免疫PCR 是迄今最敏感的一种抗原检测方法,理论上可以检测单个抗原分子,但实践中它的敏感性受许多因素的影响,如连接分子、显示系统的选择、DNA 报告分子的浓度、PCR 循环次数等。IPCR结合了酶联免疫分析的多功能性和PCR的扩增能力和灵敏性。其结果，ELISA的最低的检测限度被扩大了100－10000倍。由于PCR 产物在抗原量未达到饱和前与抗原抗体复合物的量成正比,因此免疫PCR 还可用于抗原的半定量试验。 3、巢式PCR 巢式PCR原理：是用内外两对引物扩增拷贝数较低的片段.先用外引物进行第一轮反应,将产物适当的稀释,然后用内引物继续扩增. 巢式PCR意义：比较适合微量DNA或者石蜡组织抽提的DNA 4、实时荧光PCR：利用荧光来检测PCR产物，PCR每循环一次就收集一个数据，通过实时扩增曲线，准确确定CT值，从而确定其实DNA拷贝数 5、原位PCR技术：原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术. 原位PCR是Hasse等于1990年建立的，实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落细胞、血细胞等.其基本方法为①固定组织或细胞:将组织细胞固定于预先用四氟乙烯包被的玻片上，并用多聚甲醛处理，再灭活除去细胞内源性过氧化物酶.②蛋白酶K消化处理:用60ug/ml的蛋白酶K将固定好的组织细胞片55℃消化处理2h后，96℃2min以灭活蛋白酶K.③PCR扩增:在组织细胞片上，加PCR反应液，覆盖并加液体石蜡后，直接放在扩增仪的金属板上，进行PCR循环扩增.有的基因扩增仪带有专门用于原位PCR的装置.④杂交PCR扩增结束后，用标记的寡核苷酸探针进行原位杂交.⑤显微镜观察结果.另外还有膜结合PCR、锚定PCR、固着PCR、原位PCR、不对称PCR、长距离PCR、降落伞PCR、梯度PCR等30几种PC